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江蘇蘇州智淼消防主營(yíng):全套消防檢測(cè)設(shè)備、電氣檢測(cè)設(shè)備、甲乙級(jí)防雷檢測(cè)工具、火災(zāi)現(xiàn)場(chǎng)勘查箱、消防監(jiān)督檢查箱、二合一消防煙槍、試水/細(xì)水霧裝置、消防安全評(píng)估設(shè)備配備;提供代送檢服務(wù)。
淺淡檢查儀器及應(yīng)用
作者:江蘇消防檢測(cè)設(shè)備 來(lái)源:http://yghthg.com/發(fā)布時(shí)間:2020-08-20 16:03:34
一個(gè)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的可靠性是由其精密度、準(zhǔn)確性及可比性所決定的,一般必需從下面幾方面著手。 
一. 選好測(cè)定方法; 
二. 購(gòu)買質(zhì)量過(guò)硬的試劑盒; 
三. 要有質(zhì)優(yōu)的測(cè)試儀器; 
四. 必需進(jìn)行正確的校準(zhǔn); 
五. 還要規(guī)范化操作; 
六. 搞好過(guò)硬的室內(nèi)質(zhì)量控制; 
七. 積極參加室間質(zhì)評(píng)活動(dòng); 
八. 還要有一支素質(zhì)高的隊(duì)伍。
現(xiàn)就生化分析儀檢查儀器的校準(zhǔn)問(wèn)題提出個(gè)人看法。 
 
一、 校準(zhǔn)的重要性和必要性 
    首先必須明確生化分析儀不論如何先進(jìn),它還是一個(gè)比較器,它測(cè)試出來(lái)的標(biāo)本結(jié)果是隨著標(biāo)準(zhǔn)限的設(shè)置不同而變化的。所以,在衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心擬定的“臨床實(shí)驗(yàn)室(定量測(cè)定)室內(nèi)質(zhì)控工作指南”中明確指出“對(duì)測(cè)定標(biāo)本的儀器一定要求進(jìn)行校準(zhǔn),校準(zhǔn)時(shí)要選擇合適的(配套的)標(biāo)準(zhǔn)品/校準(zhǔn)品;如有可能,校準(zhǔn)品應(yīng)能溯源到參考方法或/和參考物質(zhì);對(duì)不同的分析項(xiàng)目要根據(jù)其特性確立各自的校準(zhǔn)頻率。”這說(shuō)明校準(zhǔn)儀器是室內(nèi)質(zhì)控的重要部分,強(qiáng)調(diào)了校準(zhǔn)工作的必要性和重要性,同時(shí)指出了校準(zhǔn)的方法和要求。 
 
二、 確立測(cè)定系統(tǒng)的概念 
    對(duì)于一個(gè)臨床檢測(cè)項(xiàng)目,如果所用方法的測(cè)定原理、試劑、儀器、校準(zhǔn)品中任何一個(gè)不同,都可能得到不同的測(cè)定結(jié)果。因此,測(cè)定系統(tǒng)包括測(cè)定原理、試劑、儀器、校準(zhǔn)品四要素。如果我們想要得到準(zhǔn)確可靠的測(cè)定結(jié)果,而該結(jié)果又具有與國(guó)際、國(guó)內(nèi)其他實(shí)驗(yàn)室的可比性,應(yīng)該自己建立一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定系統(tǒng)。在全自動(dòng)生化分析儀上使用配套的試劑和標(biāo)準(zhǔn)品,即日立7170使用寶靈曼的試劑和校準(zhǔn)品(c.f.a.s),在貝克曼CX-7生化分析儀上使用貝克曼的試劑和校準(zhǔn)品等。各儀器廠家均有自己的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定系統(tǒng)。對(duì)于校準(zhǔn)品不能亂用,如絕對(duì)不能用貝克曼的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)日立生化儀,同樣也不能用寶靈曼的校準(zhǔn)品去校準(zhǔn)貝克曼生化儀。 
 
三、 校準(zhǔn)品和質(zhì)控品 
    校準(zhǔn)品(Calibration materials)含有已知量的欲測(cè)物,用以校準(zhǔn)該測(cè)定方法的數(shù)值,它與該方法及試劑、儀器是相關(guān)聯(lián)的。校準(zhǔn)品的作用是為了減少或消除儀器、試劑等造成的系統(tǒng)誤差。因此最好為人血清基質(zhì),以減少基質(zhì)效應(yīng)造成的誤差。 
    質(zhì)控品(Control materials)只用于和待測(cè)標(biāo)本同時(shí)測(cè)定的,為了控制標(biāo)本的測(cè)定誤差,因此要求保存時(shí)間十分穩(wěn)定。前者是校準(zhǔn)其值而后者是控制誤差用的。 
四、 校準(zhǔn)前準(zhǔn)備 
    1 .了解燈泡已使用多久?檢查飄移是否合乎要求; 
    2. 檢查比色杯的清潔及磨損情況?必要時(shí)進(jìn)行更換; 
    3. 用清潔劑泡洗管道 
    4. 測(cè)定儀器的精密度及線性是否達(dá)到儀器性能要求? 
 
五、 定值質(zhì)控血清是否可以校準(zhǔn)檢查儀器? 
    我們?cè)谙嗤瑮l件下,同時(shí)用五個(gè)進(jìn)口產(chǎn)品,每家兩種不同濃度的定值如TP、ALB、UREA、UA、ALP、GGT、CK、HBDH、LD、AMY等,在日立7170A上進(jìn)行測(cè)定(用常規(guī)試劑),詳見(jiàn)質(zhì)控血清對(duì)部份常規(guī)測(cè)定項(xiàng)目(如T、ALB、UREA、Cr、UA、K、Na、Cl、AST、ALT)結(jié)果與靶值比較: 
表  不同廠家定值質(zhì)控對(duì)TP、ALB、、AST、ALP結(jié)果與靶值 
* 從總蛋白結(jié)果來(lái)看RANBOX與Bio-Red 相差為6.45%,而寶靈曼與Bio-Red 較為接近; 
* 從白蛋白結(jié)果分析,寶靈曼與Bio-Red相對(duì)相差5.75%,與總蛋白結(jié)果明顯不同。Bio-Red則與汽巴康寧比較接近。 
* UREA結(jié)果中凡是高值均上不去,分析其原因很可能與我們采用試劑盒的質(zhì)量有關(guān),所以試劑盒的線性范圍理應(yīng)成為選擇試劑盒的重要依據(jù)之一。但從低值結(jié)果分析,也有5%的偏差(Bio-Red與Human) 
* AST與ALT測(cè)定值均低于靶值,這就涉及我們選用什么K值問(wèn)題。 
* ALP測(cè)定中RANDOX(-16.6%)與寶靈曼(2.7%)靶值之間竟相差19.3%,這可能涉及試劑盒選用緩沖液種類,PH值以及所用ε值等有關(guān)。 
 
    通過(guò)上述結(jié)果比較,說(shuō)明不同廠家生產(chǎn)的定值質(zhì)控血清靶值之間有的相差較大,提示我們決不能用定值質(zhì)控血清代替校準(zhǔn)品作校準(zhǔn)用。
 
六、 校準(zhǔn)方法 
    例如日立(Hitachi)系列您必須購(gòu)買寶靈曼(Boehringer)的試劑及其校準(zhǔn)的說(shuō)明書(shū)設(shè)置參數(shù),用c.f.a.s.校準(zhǔn)血清進(jìn)行校準(zhǔn),即可獲得各項(xiàng)目的校準(zhǔn)K值,同時(shí)觀察一下各項(xiàng)目測(cè)定時(shí)反應(yīng)進(jìn)程圖,檢查各項(xiàng)目參數(shù)設(shè)置是否在最佳位置,如不在最佳位置應(yīng)予以重新設(shè)置并測(cè)定。此時(shí)得到的K值即為準(zhǔn)確的校準(zhǔn)K值,然后測(cè)定待測(cè)的10至20份新鮮血清三次取其平均值,應(yīng)該說(shuō)此結(jié)果是用Hitachi-Boehringer檢測(cè)系統(tǒng)所獲的測(cè)定值。然后用此血清值校準(zhǔn)其它測(cè)定系統(tǒng)。 
表  日立7170、BM試劑連續(xù)四個(gè)月每天進(jìn)行校正(n=81)K值的變化 
 
七、 關(guān)于酶活性測(cè)定校準(zhǔn)問(wèn)題 
    有的主張不進(jìn)行校準(zhǔn)而采用固定K值,有的作者以為應(yīng)該進(jìn)行校準(zhǔn)。酶活力計(jì)算公式如下: 
      酶活力(u/l)=△A/min×V×106/(ε×v×1) 
      令k=V×106/(ε×v) 
      則酶活力(u/l)=△A/min×k 
    常用K值有以下幾種: 
      a) 理論K值:根據(jù)理論摩爾消光系數(shù)(ε)來(lái)計(jì)算,如NADH為6.22×103 
      b) 實(shí)測(cè)K值:由于儀器波長(zhǎng)的精密及半寬度不同,而應(yīng)根據(jù)實(shí)測(cè)ε值來(lái)設(shè)定K值 
      c) 廠家給的K值:廠家生產(chǎn)試劑盒說(shuō)明書(shū)上提供的K值(有的廠家提供6.3×103) 
      d) 校準(zhǔn)K值:通過(guò)校準(zhǔn)物直接校準(zhǔn)得到的K值 
    在日立7170A全自動(dòng)生化分析儀上,可以得到幾種不同的酶K值,見(jiàn)下表 
表 日立7170A全自動(dòng)生化分析儀上用不同方法得到幾種酶的K值 
注:1校準(zhǔn)物為寶靈曼c(diǎn).f.a.s,試劑也用寶靈曼的配套試劑。 
    2括號(hào)內(nèi)數(shù)字是該K值與理論K值相比的變化率 
    以上摘自張克堅(jiān)文章中 
 
* 從上述K值中不難發(fā)現(xiàn)實(shí)測(cè)K值大于理論K值,這說(shuō)明生化分析儀的測(cè)光系統(tǒng)還存在著一定誤差,如波長(zhǎng)、半寬度及光徑等偏差,使儀器達(dá)不到理論上的最佳狀態(tài); 
 
* 校準(zhǔn)K值與實(shí)測(cè)K值之間也存在一定的差距,即使指示物和儀器相同,其差異可能由試劑及校準(zhǔn)品造成的; 
* 作者認(rèn)為最好使用校準(zhǔn)K值,但必須由兩個(gè)先決條件:1必須使用配套的試劑;2必須使用配套的高質(zhì)量的校準(zhǔn)品,但校準(zhǔn)K值應(yīng)有其溯源性。 
 
    關(guān)于酶活標(biāo)準(zhǔn)品,歐洲標(biāo)準(zhǔn)局(BCR)和美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究院(NIST)均發(fā)表了人血清基質(zhì)的酶活性標(biāo)準(zhǔn)物,相信不久將會(huì)有公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)(校準(zhǔn))品問(wèn)世。 
 
八、 必須擬訂校準(zhǔn)計(jì)劃(文件) 
    校準(zhǔn)工作不是僅進(jìn)行一次就可萬(wàn)事無(wú)憂一勞永逸,而必須經(jīng)?;?。按照“臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制(QC)的要求(草案)”必須要求擬定校準(zhǔn)計(jì)劃,其內(nèi)容包括: 
    1.建立校準(zhǔn)方法 
      ⑴選擇合適(配套)的校準(zhǔn)品,包括校準(zhǔn)品數(shù)目、類型和濃度; 
      ⑵如有可能校準(zhǔn)品應(yīng)溯源到參考方法或參考物質(zhì); 
      ⑶確定校準(zhǔn)的頻度。至少每六個(gè)月進(jìn)行一次校準(zhǔn); 
      ⑷如有下列情況發(fā)生時(shí),必須進(jìn)行校準(zhǔn) 
* 改變?cè)噭┑姆N類,或者批號(hào)更換了。如果實(shí)驗(yàn)室能說(shuō)明改變?cè)噭┡?hào)并不影響結(jié)果的范圍,則可以不進(jìn)行校準(zhǔn); 
* 儀器或者檢驗(yàn)系統(tǒng)進(jìn)行一次大的預(yù)防性維護(hù)或者更換了重要部件,這些都有可能影響檢驗(yàn)性能; 
* 質(zhì)控反映出異常的趨勢(shì)或偏移,或者超出了實(shí)驗(yàn)室規(guī)定的接受限,采取一般性糾正措施后,不能識(shí)別和糾正問(wèn)題時(shí); 
 
2.每個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)儀器必需要有校準(zhǔn)計(jì)劃。每次校準(zhǔn)必須有詳情的記錄和分析。每次校準(zhǔn)記錄必須保存?zhèn)洳椤?/span>

      江蘇智淼消防主營(yíng):全套消防檢測(cè)設(shè)備消防安全評(píng)估設(shè)備軟件、甲乙級(jí)防雷檢測(cè)裝置電氣檢測(cè)設(shè)備、火災(zāi)現(xiàn)場(chǎng)勘查/消防監(jiān)督檢查箱、二合一消防煙槍、試水/細(xì)水霧裝置,產(chǎn)品提供帶送檢服務(wù);江蘇消防檢測(cè)設(shè)備官網(wǎng):http://yghthg.com/;服務(wù)熱線:4006-598-119
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